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濕熱滅菌法

更新時(shí)間:2014-04-02   點(diǎn)擊次數(shù):5132次

濕熱滅菌法指將物品置于滅菌柜內(nèi)利用高壓飽和蒸汽、過(guò)熱水噴淋等手段使微生物菌體中的蛋 白質(zhì)、核酸發(fā)生變性而殺滅微生物的方法。該法滅菌能力強(qiáng),為熱力滅菌中zui有效、應(yīng)用zui廣泛的滅菌方法。藥品、容器、培養(yǎng)基、無(wú)菌衣、膠塞以及其他遇高溫和潮濕不發(fā)生變化或損壞的物品,均可用本法滅菌。流通蒸汽不能*殺滅細(xì)菌孢子,一般可作為不耐熱無(wú)菌產(chǎn)品的輔助滅菌手段。

常用的滅菌方法有濕熱滅菌法、干熱滅菌法、氣體滅菌法、輻射滅菌法和過(guò)濾除菌法。可根據(jù)被滅菌物品的特性采用一種或多種方法組合滅菌。只要產(chǎn)品允許,應(yīng)盡可能選用zui終滅菌法(即產(chǎn)品分裝至包裝容器后再滅菌)滅菌。若產(chǎn)品不適合采用zui終滅菌法,可選用過(guò)濾除菌法或無(wú)菌生產(chǎn)工藝達(dá)到無(wú)菌保證要求,只要可能,應(yīng)對(duì)非zui終滅菌的產(chǎn)品作補(bǔ)充性滅菌處理(如流通蒸汽滅菌)。 
(一)濕熱滅菌法 
指將物品置于滅菌柜內(nèi)利用高壓飽和蒸汽、過(guò)熱水噴淋等手段使微生物菌體中的蛋 白質(zhì)、核酸發(fā)生變性而殺滅微生物的方法。該法滅菌能力強(qiáng),為熱力滅菌中zui有效、應(yīng)用zui廣泛的滅菌方法。藥品、容器、培養(yǎng)基、無(wú)菌衣、膠塞以及其他遇高溫和潮濕不發(fā)生變化或損壞的物品,均可用本法滅菌。流通蒸汽不能*殺滅細(xì)菌孢子,一般可作為不耐熱無(wú)菌產(chǎn)品的輔助滅菌手段。


    濕熱滅菌條件通常采用121*15min、121*15min116*40min的程序,也可采用其他溫度和時(shí)間參數(shù)。總之,必須保證對(duì)熱穩(wěn)定的物品,可采用過(guò)度殺滅法,其SAL應(yīng)<=10(-12)。熱穩(wěn)定性較差產(chǎn)品的標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間F。[指當(dāng)滅菌溫度為121,生物指示菌的耐熱參數(shù)D值為1min,滅菌溫度系數(shù)Z值為10.0時(shí)的標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間(121下計(jì)算的微生物等效滅活率)]一般不低于8min,如產(chǎn)品的熱穩(wěn)定性很差時(shí),可允許濕熱滅菌的F。低于8min,此情況下,應(yīng)在生產(chǎn)全過(guò)程中,對(duì)產(chǎn)品中污染的微生物嚴(yán)加監(jiān)控,并采取各種措施降低微生物污染水平,確保被滅菌產(chǎn)品達(dá)到無(wú)菌保證要求。 
    
采用濕熱滅菌時(shí),被滅菌物品應(yīng)有適當(dāng)?shù)陌b和裝載方式,不能排列過(guò)密,以保證滅菌的有效性和均一性。 
    
濕熱滅菌工藝驗(yàn)證時(shí),應(yīng)進(jìn)行熱分布試驗(yàn)、熱穿透試驗(yàn)和生物指示劑驗(yàn)證試驗(yàn)。以確定滅菌柜空載及不同裝載時(shí)腔室中的熱分布狀況及可能存在的冷點(diǎn);在空載條件下,確認(rèn)121時(shí)腔室各點(diǎn)的溫度差值應(yīng)<1;使用插入實(shí)際物品或模擬物品內(nèi)的溫度探頭,確認(rèn)滅菌柜在不同裝載時(shí),zui冷點(diǎn)物品的標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間(F。)達(dá)到設(shè)定的標(biāo)準(zhǔn);用生物指示劑進(jìn)一步確認(rèn)在不同裝載時(shí)冷點(diǎn)處的滅菌物品達(dá)到無(wú)菌保證水平。本法常用的生物指示劑為嗜熱脂肪芽孢桿菌孢子。 
影響濕熱滅菌的主要因素有:微生物的種類(lèi)與數(shù)量、蒸汽的性質(zhì)、藥品性質(zhì)和滅菌時(shí)間等。
1流通蒸氣滅菌法:是指在常壓條件下,采用100攝氏度流通蒸氣加熱殺滅微生物的方法,滅菌時(shí)間通常為30-60分鐘。該法適用于消毒以及不耐高熱制劑的滅菌,但不能保證殺滅所有芽孢,是非可靠的滅菌方法。
2間歇蒸汽滅菌法:利用反復(fù)多次的流通蒸汽加熱,殺滅所有微生物,包括芽胞。方法同流通蒸汽滅菌法,但要重復(fù)3次以上,每次間歇是將要滅菌的物體放到37孵箱隔夜,目的是使芽胞發(fā)育成繁殖體。若被滅菌物不耐100高溫,可將溫度降至7580,加熱延長(zhǎng)為3060分鐘,并增加次數(shù)。適用于不耐高熱的含糖或牛奶的培養(yǎng)基。
3高壓蒸汽滅菌法:103.4千帕蒸汽壓溫度達(dá)121.3,維持15-20分鐘。
濕熱法可在較低的溫度下達(dá)到與干熱法相同的滅菌效果,因?yàn)椋?/span>濕熱中蛋白吸收水份,更易凝固變性;水分子的穿透力比空氣大,更易均勻傳遞熱能;蒸汽有潛熱存在,每1克水由氣態(tài)變成液態(tài)可釋放出529卡熱能,可迅速提高物體的溫度。
一般采用121,滅菌20-30min,如果是產(chǎn)孢子的微生物則應(yīng)采用滅菌后適宜溫度下培養(yǎng)幾小時(shí),再滅菌一次,以用于殺死剛剛萌發(fā)的孢子。

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